open access

https://doi.org/10.14943/doctoral.k11042

https://hdl.handle.net/2115/53201

新規ヒト血管肉腫の実験モデルの樹立と血管内皮増殖因子標的治療の検討

日本語

2013-06-28

Hokkaido University

36 p.

配架番号：2058

血管肉腫は、比較的まれな、最も悪性度の高い間葉系悪性腫瘍のひとつである(Coindre et al., 2001)。血管肉腫は様々な臓器に発生しうるが、最も頻度の高い発生部位は皮膚であり、特に高齢者の頭頸部皮膚に生じる(Rouhani et al., 2008)。治療としては、放射線療法や化学療法が施行されているが、しばしば高頻度に再発や転移を起こし、死の転帰を辿る。予後は不良であり、生存期間に関しては、5年生存率35%(Fayette et al., 2007)、もしくは生存期間の中央値は7ヶ月(Abraham et al., 2007)と報告されている。血管肉腫の病態は解明されていないことが多いが、その原因のひとつにヒト血管肉腫の実験モデルが非常に限られている点があげられる。ヒト血管肉腫の培養細胞は、過去にISO-HAS (Masuzawa et al., 1999) およびAS-M (Krump-Konvalinkova et al., 2003) の２つの培養細胞が報告されているのみである。ISO-HASは、マウス血管肉腫の培養上清がその細胞培養には必要であり、管理がやや煩雑であるという欠点がある。また、AS-Mはin vivoでの血管肉腫の組織を形成できないという欠点がある。なお、ヒト血管肉腫のin vivoの実験モデルを用いた治療実験はほとんど行われていない。このような状況が、ヒト血管肉腫に対する有効な治療の確立のための障壁となっているものと考えられる。血管内皮成長因子(vascular endothelial growth factor: VEGF)は最も強力な血管新生誘導因子である。悪性腫瘍には、自らを栄養する血管を誘導する腫瘍血管新生という病態が存在するが、VEGFはその病態に関与しており、腫瘍の生存に大きな役割を果たしている増殖因子の１つと考えられている(Hicklin and Ellis, 2005)。腫瘍の血管新生を阻害することで腫瘍の増大を抑制しうるという想定のもと、VEGFシグナルを標的とした様々な薬剤が開発され、腎細胞癌など一部の腫瘍に対して抗腫瘍効果を示すことが報告されている(Motzer et al., 2006)。血管肉腫は、血管内皮細胞由来の間葉系悪性腫瘍と考えられており、VEGFはその病態に大きく関与していていると考えられている(Park et al., 2010)。実際、血管肉腫の組織ではVEGFやVEGF受容体(VEGF receptors: VEGFRs)が発現しており、血管肉腫の増殖や浸潤、転移にはVEGFシグナルが関与していると想定されている(Itakura et al., 2008; Tokuyama et al., 2010)。このことから、VEGFシグナルを標的とした治療薬は、血管肉腫に対して有望な治療薬になりうるものと期待されている。そこで、血管肉腫に対してVEGFシグナルを標的とした薬剤が有効なのではないか、という仮説を立て、この仮説を検証するため実験を行った。まず、ヒト血管肉腫の切除検体を免疫抑制マウスへ移植してxenograftを作成した。このxenograftからヒト血管肉腫の培養細胞を樹立した。また、xenograft由来のヒト血管肉腫組織を免疫抑制マウスで継代維持することで、in vivo実験モデルとして使用した。培養細胞を用いた検討から、VEGFは血管肉腫の増殖を促進する効果があることが示された。よって、VEGFシグナルを標的とした治療実験として、抗VEGF抗体(bevacizumab)および受容体型チロシンキナーゼ阻害剤(sunitinib malate)を用いた。しかし、これらの薬剤は、単剤ではin vitroおよびin vivoともに抗腫瘍効果を示さなかった。血管肉腫組織ではVEGFとVEGF受容体の発現が見られることから、VEGFがautocrineおよびparacrineにより制御され、その増殖や生存に関与していると考えられている。そこで、sunitinib malateにてVEGF受容体を阻害すると、代償的にVEGFの産生が亢進する可能性について検討を加えた。しかし、sunitinib malateを投与しても代償的なVEGFの産生亢進は確認されなかった。以上の結果から、今回用いたbevacizumabおよびsunitinib malateは、単剤使用においては血管肉腫に対する抗腫瘍効果を示さない可能性が高いことが示された。また、sunitinib malateが無効であった理由は、代償的なVEGFシグナルの活性化によるものではないと考えられた。

2013-06-28

甲第11042号

博士(医学)

(主査) 教授 佐邊 壽孝, 教授 畠山 鎮次, 教授 趙 松吉, 教授 田中 伸哉

医学研究科（医学専攻）

博士論文

Version of Record