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https://doi.org/10.14943/doctoral.k14526

https://hdl.handle.net/2115/96792

RAW細胞の継代数が破骨細胞分化誘導系に与える影響

日本語

2021-03-25

Hokkaido University

歯科矯正治療による歯の移動は、メカニカルストレスに対する歯周組織の反応として捉えることができる。歯周組織に矯正力が加わることにより、圧迫側では骨添加の抑制と骨吸収の促進が、牽引側では骨吸収の抑制と骨添加の促進が起こり、骨のリモデリングが生じる。細胞に直接的に機械的刺激を加えることで、RAW264.7(RAW)細胞から破骨細胞への分化誘導系に与える影響を調べようとしたところ、RAW細胞の継代数により破骨細胞の分化・融合に違いが生じた。RAW細胞の継代数と破骨細胞の分化誘導系の関連を検討した報告は未だないため、本研究で検討した。継代数が10未満であるNlORAW細胞と継代数が30以上であるN30RAW細胞に対して破骨細胞誘導培地を用いて7日間培養し、破骨細胞数の推移を観察した。NlORAW細胞から分化したNlO破骨細胞は4日目をピークとして増加し、その後減少した。N30RAW細胞から分化したN30破骨細胞は6日目をピークとして増加し、その後減少した。次に、細胞増殖試験を行った結果、NlORAW細胞とN30RAW細胞に有意差を認めなかった。破骨細胞関連遺伝子であるTRAP、RANK、CD47、NFATcl、DC-STAMP、QC-STAMP、Integrin a V、Integrinf3 Ill、CDlla、CDllbの発現量の差を調査するために、Real time RT-PCR法を行った。培養3日目ではRANK、NFATcl、Integrinf3 IIIでは有意差を認めなかったが、細胞融合因子であるCD47、DC-STAMP、OCSTAMP、Integrina Vにおいて、NlO破骨細胞と比較してN30破骨細胞では有意に減少した。これらの結果から培養3日目にNlO破骨細胞と比較してN30破骨細胞では破骨細胞の細胞融合が抑制されることが示唆された。以上の結果から、破骨細胞への分化が早いNlO破骨細胞と分化が遅いN30破骨細胞を実験に用いる際には、それぞれの特性を活かして用いなければならないことが示唆された

2021-03-25

甲第14526号

博士(歯学)

(主査) 教授 飯村 忠浩, 教授 網塚 憲生, 教授 佐藤 嘉晃, 准教授 吉村 善隆

歯学院（口腔医学専攻）

博士論文

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