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Polarization-dependent fluorescence correlation spectroscopy for studying structural properties of proteins in living cell

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タイトル: Polarization-dependent fluorescence correlation spectroscopy for studying structural properties of proteins in living cell
著者: Oura, Makoto 著作を一覧する
Yamamoto, Johtaro 著作を一覧する
Ishikawa, Hideto 著作を一覧する
Mikuni, Shintaro 著作を一覧する
Fukushima, Ryousuke 著作を一覧する
Kinjo, Masataka 著作を一覧する
発行日: 2016年 8月 5日
出版者: Nature Publishing Group
誌名: Scientific reports
巻: 6
開始ページ: 31091
出版社 DOI: 10.1038/srep31091
抄録: Rotational diffusion measurement is predicted as an important method in cell biology because the rotational properties directly reflect molecular interactions and environment in the cell. To prove this concept, polarization-dependent fluorescence correlation spectroscopy (pol-FCS) measurements of purified fluorescent proteins were conducted in viscous solution. With the comparison between the translational and rotational diffusion coefficients obtained from pol-FCS measurements, the hydrodynamic radius of an enhanced green fluorescent protein (EGFP) was estimated as a control measurement. The orientation of oligomer EGFP in living cells was also estimated by pol-FCS and compared with Monte Carlo simulations. The results of this pol-FCS experiment indicate that this method allows an estimation of the molecular orientation using the characteristics of rotational diffusion. Further, it can be applied to analyze the degree of molecular orientation and multimerization or detection of tiny aggregation of aggregate-prone proteins.
資料タイプ: article
URI: http://hdl.handle.net/2115/63083
出現コレクション:雑誌発表論文等 (Peer-reviewed Journal Articles, etc)

提供者: 金城 政孝

 

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